Οι επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα

πρόπολη και άσθμα

Τα προϊόντα μελισσών και η πρόπολη χρησιμοποιούνται εμπειρικά για αιώνες, ειδικά για τη θεραπεία αναπνευστικών ασθενειών

Η παρούσα μελέτη αξιολόγησε την επίδραση της θεραπείας με ένα υδροαλκοολικό εκχύλισμα πρόπολης (PHE) που παράγεται από την Scaptotrigona aff. postica stingless μέλισσα σε μοντέλο άσθματος ποντικού. Τα ποντίκια BALB / c ανοσοποιήθηκαν δύο φορές με ωοαλβουμίνη (OVA) υποδορίως. Μετά από 14 ημέρες, προκλήθηκαν ενδορινικά με OVA. Οι ομάδες P50 και P200 έλαβαν PHE με μετρητή σε δόσεις 50 και 200 ​​mg / kg, αντίστοιχα. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Πηγή: NCBI (National Center for Biotechnology Information) Effects of Stingless Bee Propolis on Experimental Asthma

Η ομάδα DEXA υποβλήθηκε σε θεραπεία με ενδοπεριτοναϊκή ένεση δεξαμεθαζόνης. Η ομάδα OVA έλαβε μόνο νερό. Τα ποντίκια ήταν υποβλήθηκαν σε θεραπεία καθημερινά για δύο εβδομάδες και στη συνέχεια ανοσοποιήθηκαν για δεύτερη φορά με ενδορινικό OVA Η θεραπεία με PHE μείωσε τον αριθμό των κυττάρων στο βρογχοκυψελιδικό υγρό (BAL). Η ιστολογική ανάλυση έδειξε μειωμένη περιβρογχοαγγειακή φλεγμονή μετά από θεραπεία με PHE ειδικά την διήθηση πολυμορφικών πυρηνικών κυττάρων. Επιπλέον, η συγκέντρωση ιντερφερόνης-𝛾 (IFN-𝛾) στον ορό μειώθηκε. Αυτά τα αποτελέσματα ήταν παρόμοια με αυτά που ελήφθησαν με δεξαμεθαζόνη. Η θεραπεία με S. aff postica propolis μείωσε την παθολογία που σχετίζεται με το μυϊκό άσθμα λόγω της αναστολής της μετανάστευσης των φλεγμονωδών κυττάρων στον κυψελιδικό χώρο και της συστημικής εξέλιξης της αλλεργικής φλεγμονής.

Εισαγωγή

Το άσθμα θεωρείται ένα σημαντικό πρόβλημα δημόσιας υγείας που επηρεάζει περίπου το 10% του παγκόσμιου πληθυσμού.

Είναι μία χρόνια φλεγμονώδης νόσος των αεραγωγών στις οποίες πολλά κύτταρα παίζουν σημαντικό ρόλο [1].

Παρατηρείται διείσδυση μέσω αέρος από μαστοκύτταρα, ηωσινόφιλα, δενδριτικά κύτταρα, μακροφάγα, ουδετερόφιλα και Τ λεμφοκύτταρα σε φλεγμονώδεις αποκρίσεις των πνευμόνων, οι οποίες σχετίζονται με την αυξημένη έκφραση πολλαπλών πρωτεϊνών που εμπλέκονται σε ένα σύνθετο φλεγμονώδες καταρράκτη που προκαλείται από κυτοκίνες, χημειοκίνες και λιπίδια διαμεσολαβητές [2].

Αυτή η ασθένεια μπορεί να παρουσιάσει άμεση αντίδραση ακολουθούμενη από μια φάση καθυστερημένης απόκρισης. Σε πειραματικό μοντέλο, η άμεση φάση μπορεί να μεταφερθεί επιδέξια με ορό, ενώ η όψιμη φάση μεταφέρεται με CD4 + T βοηθητικά λεμφοκύτταρα τύπου 2 (Th2). Τόσο το IgE όσο και τα ιστιοκύτταρα είναι ζωτικής σημασίας για την ενεργοποίηση της άμεσης αλλεργικής φάσης. Σε την τελευταία φάση, η συμμετοχή των κυττάρων Th2 είναι κρίσιμη ως υπεύθυνα για την απελευθέρωση κυτοκινών, συμπεριλαμβανομένων από τις ιντερλευκίνες (IL) IL-4, IL-5, IL-9 και IL-13, οι οποίες, με τη σειρά τους, ευθύνονται για την ηωσινοφιλική φλεγμονή [3].

Παρά τη γνώση σχετικά με το ρόλο των κυτοκινών Th2 και της IgE στα πειραματικά μοντέλα του άσθματος, έχει αποδειχθεί ότι η Συμπληρωματική και Εναλλακτική Ιατρική με βάση τα στοιχεία, το Th1, που σχετίζεται με την απόκριση Th2, είναι επίσης σημαντική στην πνευμονική βλάβη. Το προφίλ Th1 αυτό καθαυτό δεν προκαλεί κανένα χαρακτηριστικό άσθματος, αλλά την ιντερφερόνη-𝛾 (IFN-𝛾) έχει έχει συσχετιστεί με την παθογένεση του άσθματος και τη σοβαρότητα αυτής της νόσου [4]. Σε ένα μοντέλο άσθματος, αποδείχθηκε ότι η χορήγηση αντισώματος εξουδετέρωσης σε IFN-𝛾 καταστέλλει την υπερδραστικότητα των αεραγωγών, ως δικαιολογημένη αναστολή αυτής της κυτοκίνης για τη θεραπεία του άσθματος.

Επί του παρόντος, τα γλυκοκορτικοειδή είναι η πιο αποτελεσματική θεραπεία για το άσθμα και έχουν αποδειχθεί ασφαλή. Η αποτελεσματικότητά τους έχει τεκμηριωθεί καλά στην πρόληψη της νοσηρότητας και της θνησιμότητας που σχετίζεται με το άσθμα και στη βελτίωση της πρόγνωσης της νόσου, συμπεριλαμβανομένης της μείωσης των νοσηλείας, της πρόληψης της υποτροπής και της προώθησης της ανάρρωσης, ειδικά σε ασθενείς με σοβαρό άσθμα και σε παιδιά [6]. Ωστόσο, η παρατεταμένη συστηματική χρήση τους μπορεί να προκαλέσει πολλές ανεπιθύμητες παρενέργειες που σχετίζονται με τα προϊόντα του καταβολισμού τους, μια ανοσοκαταστολή [7]. Υπάρχει ακόμη ο φιλόδοξος στόχος στη φαρμακευτική βιομηχανία να παράγει στεροειδή ανάλογα που αποφεύγουν τις παρενέργειες και διατηρούν τη θεραπευτική αποτελεσματικότητα
[8].


Έτσι, τα πειραματικά μοντέλα άσθματος ποντικών έχουν αναπτυχθεί χρησιμοποιώντας διάφορους τύπους γνωστών αλλεργιογόνων [9, 10] και έχουν συμβάλει σημαντικά στη μελέτη των φλεγμονωδών μηχανισμών του άσθματος και στη δοκιμή νέων φαρμάκων, ειδικά εκείνων που προέρχονται από την εμπειρική χρήση φυσικών προϊόντων όπως αυτά που παράγονται από τις μέλισσες, σε προσπάθειες ελαχιστοποίησης της ταλαιπωρίας που συμβαίνει κατά τη διάρκεια κρίσεων άσθματος. Η πρόπολη που παράγεται από αφρικανικές μέλισσες είναι ένας ισχυρός αντιφλεγμονώδης παράγοντας στην οξεία και χρόνια φλεγμονή, ο οποίος έχει επιβεβαιωθεί μέσω πειραμάτων in vitro και in vivo με αιθανολικά και υδατικά εκχυλίσματα πρόπολης ή με ενώσεις που έχουν απομονωθεί από την πρόπολη [11–14].


Έχει αποδειχθεί ότι τα συστατικά που προέρχονται από την πρόπολη ενεργοποιούν τους μακροφάγους και ότι οι πολυφαινόλες μπορεί να είναι υπεύθυνες για την αύξηση της ικανότητας των μακροφάγων στα φαγοκύτταρα να διεγείρουν τα λεμφοκύτταρα και να σκοτώνουν μικροοργανισμούς και όγκους [14–16].

Ένα σημαντικό γεγονός είναι ότι παρά την ενεργοποίηση των μακροφάγων και την πρόκληση της απελευθέρωσης των ελεύθερων ριζών, οι πολυφαινόλες είναι ευρέως γνωστές ως αντιοξειδωτικά [17, 18] που δεσμεύουν τις υπερβολικές ελεύθερες ρίζες που δημιουργούνται από μακροφάγα και ουδετερόφιλα [19]. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα


Παρόλο που πολλά είναι ήδη γνωστά για τη θεραπευτική δράση της πρόπολης που παράγεται από αφρικανικές μέλισσες, έχει γίνει λίγη έρευνα σχετικά με τις θεραπευτικές ιδιότητες της πρόπολης που παράγεται από τις άκαρπες μέλισσες. Επομένως, η παρούσα εργασία αξιολόγησε την επίδραση της πρόπολης που παρήγαγε η Scaptotrigona aff. postica, μια άκαρπη μέλισσα, σε πνευμονική φλεγμονή λόγω ενός πειραματικού άσθματος που προκαλείται σε ποντίκια.

Υλικό και μέθοδοι

Η παρασκευή του Υδροαλκοολικού Εκχυλίσματος Πρόπολης (PHE).

Η πρόπολη παράγεται από τη Scaptotrigona aff. Η συλλέχθηκε από τα εσωτερικά μέρη μιας κυψέλης που βρίσκεται στο δήμο Barra do Corda, πολιτεία Maranhao, Βραζιλία. Η πρόπολη in natura εκχυλίστηκε με διαποτισμό σε αιθανόλη (70%) για 24 ώρες. Το εκχυλιστικό διάλυμα διηθήθηκε και συμπυκνώθηκε σε μικρό όγκο στους 40 ° C σε περιστροφικό εξατμιστή υπό χαμηλή πίεση, λαμβάνοντας το υδροαλκοολικό εκχύλισμα πρόπολης (ΡΗΕ). Το ξηρό βάρος υπολογίστηκε αποδίδοντας 9 g προϊόντος (4%) [16]. Τα φλαβονοειδή, το φαινολικό οξύ και το συνολικό περιεχόμενο φαινόλης που βρέθηκαν στο PHE ήταν 0,55 ± 0,07%, 11,40 ± 0,73% και 11,95 ± 0,80%, αντίστοιχα [20]. 2.2.

Τα ζώα. Ενήλικα θηλυκά ποντίκια BALB / c ηλικίας δύο έως τριών μηνών (𝑛 = 5 / ομάδα) χορηγήθηκαν από το Animal Facility του Ομοσπονδιακού Πανεπιστημίου του Maranhao. Κατά τη διάρκεια των μελετών,, τα ζώα συντηρήθηκαν στο Animal Facility του Immunophysiology Laboratory υπό ελεγχόμενες περιβαλλοντικές συνθήκες. Τόσο το νερό όσο και το φαγητό προσφέρθηκαν ελεύθερα μέχρι την ημέρα της θυσίας. Ο χειρισμός των ζώων συμμορφώθηκε με τους ηθικούς κανόνες που καθιερώθηκαν από το Βραζιλιάνικο Κολλέγιο Πειραματισμού Ζώων και το παρόν έργο εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας για την Έρευνα των Ζώων του Κρατικού Πανεπιστημίου του Maranhao (αριθμός πρωτοκόλλου ˜ 010/2007).

Οβαλβουμίνη- (OVA-). Προκαλούμενη αλλεργική πνευμονική φλεγμονή. Τα ζώα ανοσοποιήθηκαν υποδορίως (sc.) Με 4 μ§ ΟνΑ προσροφημένα σε 1,6 mg υδροξειδίου του αργιλίου (στυπτηρία). Μετά από επτά ημέρες, η ίδια διαδικασία επαναλήφθηκε. Μετά από άλλες επτά ημέρες, τα ζώα αναισθητοποιήθηκαν ελαφρά με 0,4 mL διαλύματος υδροχλωρικής ξυλαζίνης (20 mg / kg) και προκλήθηκαν με ενδορρινική ενστάλαξη (σε.) Με διάλυμα OLA 50 μL (10 μg OVA / 50 μL αποστειρωμένο φωσφορικό- φυσιολογικό ορό (PBS)). Επτά ημέρες μετά την πρώτη πρόκληση, τα ζώα προκλήθηκαν ξανά με την ίδια λύση [21]. Μετά από 24 ώρες, συλλέχθηκε αίμα για να ληφθεί ο ορός και τα ζώα υποβλήθηκαν σε ευθανασία χρησιμοποιώντας θανατηφόρο ί.ρ. ένεση 10% ένυδρου χλωραλίου.

Θεραπεία αλλεργικής πνευμονικής φλεγμονής με PHE. Οι θεραπείες άρχισαν αμέσως μετά τη δεύτερη ανοσοποίηση. Τα ζώα υποβλήθηκαν σε αγωγή από του στόματος με 100 μΙ PHE σε δόσεις 50 ή 200 mg / kg / ζώο (Ρ50 και Ρ200, αντίστοιχα) για 14 συνεχόμενες ημέρες. Τα ζώα στην ομάδα θετικού μάρτυρα έλαβαν ί.ρ. ενέσεις 100 μL δεξαμεθαζόνης (DEXA) σε 1 mg / kg / ζώο για 14 συνεχόμενες ημέρες. Η ομάδα αρνητικού μάρτυρα (OVA) έλαβε μόνο από του στόματος αλατούχα διαλύματα. Ο καθαρός μάρτυρας ούτε ευαισθητοποιήθηκε ούτε προκλήθηκε.

Συλλογή και καταμέτρηση κυττάρων βρογχοκυψελιδικής πλύσης (BAL). Για κάθε ζώο, η τραχεία του ζώου εκτέθηκε και 0,5 mL ψυχρού PBS εγχύθηκε στον βρογχοκυψελιδικό χώρο. Μετά την αναρρόφηση BAL, εγχύθηκαν και αναρροφήθηκαν άλλα 0,5 mL PBS. Για τον προσδιορισμό του συνολικού αριθμού κυττάρων BAL, 90 μL των κυτταρικών αιωρημάτων σταθεροποιήθηκαν και βάφτηκαν σε διάλυμα 10 μL που περιείχε 0,05% κρυσταλλικό ιώδες αραιωμένο σε 30% οξικό οξύ. Στη συνέχεια, τα κύτταρα μετρήθηκαν σε θάλαμο Neubauer με τη βοήθεια οπτικού μικροσκοπίου σε μεγέθυνση 400x.

Ιστοπαθολογική αξιολόγηση των πνευμόνων. Μετά τη συλλογή BAL, οι πνεύμονες διαποτίστηκαν με 10 mL PBS μέσω ενός σωληνίσκου που εισήχθη στη δεξιά κοιλία για την απομάκρυνση του υπολειπόμενου αίματος, και οι πνεύμονες ζυγίστηκαν και σταθεροποιήθηκαν με εμβάπτιση σε ρυθμισμένη φορμαλίνη (10%). Μετά από 24 ώρες, τα όργανα μεταφέρθηκαν σε διάλυμα αλκοόλης 70% έως ότου ενσωματωθεί η παραφίνη. Οι ιστοί κόπηκαν σε τομές 5 μm και βάφτηκαν με αιματοξυλίνη / ηωσίνη για ιστοπαθολογική εξέταση. Η φλεγμονώδης διαδικασία στις ιστολογικές τομές αξιολογήθηκε ποιοτικά και χαρακτηρίστηκε ως απουσία, ήπια, μέτρια ή σοβαρή σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά της πληγείσας περιοχής.

Συλλογή και καταμέτρηση κυττάρων από το περιτοναϊκό πλύσιμο και τα λεμφοειδή όργανα. Για να εξακριβώσουμε εάν τα αποτελέσματα της PHE που παρατηρήθηκαν στον πνεύμονα θα μπορούσαν να οφείλονται σε συστηματική ανοσοκαταστολή, αξιολογήσαμε λεμφοειδή όργανα και επίσης την περιτοναϊκή κοιλότητα. Η περιτοναϊκή κοιλότητα του ζώου πλύθηκε με 5 mL αποστειρωμένου PBS.

Μετά από εκτομή κοιλιακού τοιχώματος, εναιωρήματα κυττάρων λήφθηκαν με αναρρόφηση χρησιμοποιώντας σύριγγα και βελόνα, μεταφέρθηκαν σε σωλήνες πολυπροπυλενίου κωνικού πυθμένα και διατηρήθηκαν σε λουτρό πάγου (4∘C) έως ότου μετρήθηκαν τα κύτταρα. Μετά τη συλλογή της περιτοναϊκής πλύσης, ο σπλήνας και οι μεσεντερικοί λεμφαδένες συλλέχθηκαν, ζυγίστηκαν και θρυμματίστηκαν. Ο μηριαίος εγχύθηκε με 1 mL PBS για να ληφθούν κύτταρα μυελού των οστών.

Για τον υπολογισμό του συνολικού αριθμού κυττάρων, 90 μL κάθε κυτταρικού εναιωρήματος στερεώθηκε και βάφτηκε με 10 μL 0,05% κρυσταλλικό ιώδες σε 30% οξικό οξύ. Τα κύτταρα μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας θάλαμο Neubauer με τη βοήθεια οπτικού μικροσκοπίου σε μεγέθυνση 400x.

Ποσοτικός προσδιορισμός του ορού Interferon Gamma (IFN-𝛾). Το IFN-𝛾 έχει αποδειχθεί ότι εμπλέκεται στην παθογένεση του άσθματος και μπορεί να βρεθεί σε ατοπικούς ασθενείς [4]. Έτσι, ποσοτικοποιήσαμε αυτήν την κρίσιμη κυτοκίνη στον ορό. Ο ποσοτικός προσδιορισμός πραγματοποιήθηκε σε πλάκες μικρολίτρων επίπεδου πυθμένα 96 φρεατίων (Costar) οι οποίες επικαλύφθηκαν με προσθήκη 100 ml πρωτογενούς αντισώματος αντι-ΙΡΝ–και επώαση όλη τη νύκτα στους 4 ° C. Μετά την επώαση, η πλάκα αντιστράφηκε και πλύθηκε τρεις φορές με PBS + Tween 20 (PBS + T20, 300 𝜇L / φρεάτιο) και μπλοκάρονται με 200 μL / φρεάτιο 10% βόειο εμβρυϊκό ορό (FBS) σε PBS για μία ώρα σε θερμοκρασία δωματίου.

Τα φρεάτια αναρροφήθηκαν και πλύθηκαν τρεις φορές με PBS + T20. Προστέθηκαν οροί ζώων (δείγμα 100 ml / φρεάτιο) και τα δείγματα επωάστηκαν για δύο ώρες σε θερμοκρασία δωματίου. Τα φρεάτια αναρροφήθηκαν και πλύθηκαν πέντε φορές με PBS + T20 (300 μL / φρεάτιο) και στη συνέχεια προστέθηκαν 100 μL / φρεάτιο συζευγμένου με αβιδίνη / υπεροξειδάση αντισώματος ανίχνευσης. Οι πλάκες στη συνέχεια επωάστηκαν για μία ώρα και πλύθηκαν επτά φορές με PBS + T20 και προστέθηκαν 100 μL / φρεάτιο διάλυμα υποστρώματος τετραμεθυλοβενζιδίνης (ΤΜΒ). Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Οι πλάκες επωάστηκαν για 30 λεπτά στο σκοτάδι, και στη συνέχεια η αντίδραση σταμάτησε με προσθήκη 50 μL 2Ν H2S04. Η ανάγνωση της οπτικής πυκνότητας διεξήχθη χρησιμοποιώντας αυτόματη συσκευή ανάγνωσης ανοσοπροσροφητικού ενζυμοσυνδεδεμένου (ELISA) στα απορροφητικά 450 nm (Dynatech).

Στατιστική ανάλυση. Η ανάλυση των αποτελεσμάτων έγινε χρησιμοποιώντας το στατιστικό λογισμικό Graph-Pad, έκδοση 5.0. Σημαντικές διαφορές μεταξύ των θεραπειών προσδιορίστηκαν με ανάλυση διακύμανσης (ANOVA), ακολουθούμενη από δοκιμή Tukey-Kramer. Οι στατιστικές έννοιες έγιναν αποδεκτές όταν 𝑃 ≤ 0,05. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση ± τυπική απόκλιση.

Σχήμα 1: Επίδραση της θεραπείας με Scaptotrigona aff. postica PHE σχετικά με τον αριθμό των κυττάρων που υπάρχουν στο BAL ποντικών που ανοσοποιήθηκαν και προκλήθηκαν με ΟνΑ. Τα ποντίκια στις ομάδες Ρ50 και Ρ200 υποβλήθηκαν σε θεραπεία από του στόματος με PHE (50 ή 200 mg / kg / ζώο) για 14 συνεχόμενες ημέρες.

Η ομάδα DEXA υποβλήθηκε σε θεραπεία ενδοπεριτοναϊκώς με DEXA (1 mg / kg / ζώο) για 14 συνεχόμενες ημέρες. Η ομάδα OVA έλαβε μόνο πόσιμο διάλυμα φυσιολογικού ορού. Ο συνολικός αριθμός (a) και ο διαφορικός (b) αριθμός κυττάρων του BAL πραγματοποιήθηκαν 24 ώρες μετά την τελευταία πρόκληση. 0.0 𝑃 <0,05 σε σύγκριση με την ομάδα OVA. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Αποτελέσματα

Επίδραση της θεραπείας με PHE στον αριθμό των κυττάρων που υπάρχουν στο BAL ποντικών που έχουν ανοσοποιηθεί και προκαλέσει OVA. Το Σχήμα 1 δείχνει τον συνολικό και διαφορικό αριθμό κελιού στο BAL. Υπήρξε σημαντική μείωση του συνολικού αριθμού κυττάρων BAL και στις δύο ομάδες που υποβλήθηκαν σε αγωγή με PHE (P50 και P200) σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου OVA. Αυτή η μείωση ήταν παρόμοια με αυτήν που παρατηρήθηκε στην ομάδα DEXA (50%). Δεν υπήρχε διαφορά μεταξύ των ομάδων DEXA, P50 και P200 (Σχήμα 1 (α)). Ο διαφορικός αριθμός των κυττάρων BAL έδειξε ότι η ομάδα ελέγχου OVA έδειξε υψηλότερο ποσοστό πολυμορφικών πυρηνικών φλεγμονωδών κυττάρων.

Σχήμα 2: Ιστοπαθολογικές τομές πνευμόνων ποντικών BALB / c βαμμένες με αιματοξυλίνη / ηωσίνη. Τα ποντίκια ανοσοποιήθηκαν τις ημέρες 0 και 7 με sc. ενέσεις 4 μg OVA / 1,6 mg στυπτηρίας. Τις ημέρες 14 και 21, τα ποντίκια προκλήθηκαν από το. Με 10 μg OVA. Τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν 24 ώρες μετά την τελευταία πρόκληση. Δόθηκαν δύο μεγεθύνσεις (400 και 100χ) στον καθαρό μάρτυρα (α), σε ανοσοποιημένο με ΟνΑ (β), σε αγωγή με DEXA (γ) και σε ομάδες που έλαβαν ΡΗΕ στα 50 mg / kg (d) ή στα 200 mg / kg ( μι). Τα βέλη δείχνουν περιοχές φλεγμονής. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.


Επίδραση της θεραπείας με PHE στην ιστολογία των πνευμόνων ποντικών ανοσοποιημένων και προκλητικών με OVA. Το Σχήμα 2 δείχνει ιστολογικές τομές πνευμόνων ποντικών από τις διάφορες ομάδες σε φωτομικρογραφίες που ελήφθησαν με μεγέθυνση 40x. Το Σχήμα 2 (α) δείχνει μια τομή από ένα καθαρό ζώο ελέγχου, χωρίς πρόκληση OVA, στην οποία μπορεί να παρατηρηθεί ένα καθαρό παρέγχυμα χωρίς διήθηση. Αντίθετα, η ανάλυση των ιστολογικών τομών πνευμονικών ποντικών στην ομάδα OVA δείχνει έντονη περιβρογχοαγγειακή διήθηση και επιθηλιακή απολέπιση (Σχήμα 2 (β)). Οι θεραπείες DEXA (Σχήμα 2 (γ)), ​​Ρ50 (Σχήμα 2 (δ)) και Ρ200 (Σχήμα 2 (ε)) αποκατέστησαν το φυσιολογικό πρότυπο αρχιτεκτονικής των πνευμόνων, αποτρέποντας τη φλεγμονώδη διήθηση και την επιθηλιακή απολέπιση.


Επίδραση της θεραπείας PHE στην κυκλοφορία IFN-𝛾 σε ποντίκια που έχουν εμβολιαστεί και προκαλούν OVA. Λαμβάνοντας υπόψη το ρόλο της IFN-g στην παθογένεση του άσθματος, μετράμε αυτήν την κυτοκίνη στον ορό. Το Σχήμα 3 δείχνει ότι τα ποντίκια που έλαβαν PHE είχαν σημαντική, εξαρτώμενη από τη δόση μείωση του IFN-𝛾 στον ορό που ήταν πιο έντονη από εκείνη που παρατηρήθηκε στην ομάδα DEXA.


Επίδραση της θεραπείας PHE στην κυτταρική εισροή στην περιτοναϊκή κοιλότητα και στα λεμφοειδή όργανα ποντικών που έχουν εμβολιαστεί και προκαλούν OVA. Η θεραπεία με PHE δεν προκάλεσε αλλαγές στον αριθμό των κυττάρων στο μυελό των οστών (Σχήμα 4 (α)), λεμφαδένα (Σχήμα 4 (β)), σπλήνα (Σχήμα 4 (γ)) ή περιτόναιο (Σχήμα 4 (d )). Σε σύγκριση με τους μάρτυρες OVA, η θεραπεία με DEXA μείωσε σημαντικά τον αριθμό των κυττάρων στον λεμφαδένα, τον σπλήνα και το περιτόναιο αλλά όχι στον μυελό των οστών.

Σχήμα 3: Επίδραση της θεραπείας S. aff postica ΡΗΕ σε κυκλοφορούντα ορό IFN-serum ποντικών ανοσοποιημένων και προκλήθηκαν με OVA. Τα ποντίκια στις ομάδες Ρ50 και Ρ200 υποβλήθηκαν σε θεραπεία από του στόματος με ΡΗΕ (50 ή 200 mg / kg / ζώο) για 14 συνεχόμενες ημέρες. Η ομάδα DEXA υπέστη αγωγή ί.ρ. με DEXA (1 mg / kg / ζώο) για 14 συνεχόμενες ημέρες. Η ομάδα OVA έλαβε μόνο πόσιμο διάλυμα φυσιολογικού ορού. Τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν 24 ώρες μετά την τελευταία πρόκληση. ≤ 𝑃 ≤ 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα OVA. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Συζήτηση

Η παρούσα μελέτη δείχνει ότι η θεραπεία με το PHE που χορηγήθηκε από το στόμα μείωσε σημαντικά την αλλεργική πνευμονική φλεγμονή στο μυϊκό μοντέλο του άσθματος.

Αμφότερες οι θεραπείες με PHE (50 και 200 ​​mg / Kg) ανέστρεψαν το μοτίβο των φλεγμονωδών κυττάρων στον πνεύμονα και μειώνοντας την εισροή πολυμορφοπύρηνων φλεγμονωδών κυττάρων σε παρέγχυμα, αντιστρέφοντας το πρότυπο των φλεγμονωδών κυττάρων στον πνεύμονα και μειώνοντας την εισροή πολυμορφοπύρηνων φλεγμονωδών κυττάρων σε παρέγχυμα. Παρομοίως, αποδείχθηκε ότι τα ποντίκια που είχαν υποστεί αγωγή με πρόπολη είχαν μείωση του αριθμού των φλεγμονωδών κυττάρων στις περιτοναϊκές βρογχοκυψελιδικές περιοχές σε σύγκριση με την ομάδα που δεν έλαβε θεραπεία [22].

Αυτό το αποτέλεσμα είναι επίσης σύμφωνο με προηγούμενη μελέτη, η οποία έδειξε ότι η προσθήκη πρόπολης στα τρόφιμα ασθενών με άσθμα, ως συμπληρωματική θεραπεία στη θεραπεία αυτής της νόσου, παρείχε συγκεκριμένα πλεονεκτήματα μειώνοντας τη συχνότητα των κρίσεων και την ανάγκη για διάσωση φαρμάκων , πιθανώς βελτιώνοντας την ανοσολογική απόκριση των ασθενών [23].


Επιπλέον, η θεραπεία με PHE μείωσε σημαντικά τη συγκέντρωση IFN-,, η οποία έχει θεωρηθεί κρίσιμη για την παθογένεση του άσθματος [4, 5]. Αυτό το αποτέλεσμα είναι σύμφωνο με ορισμένες μελέτες που έχουν δείξει ότι η πρόπολη πρόχειρα βραχυπρόθεσμα σε ποντίκια επηρέασε τόσο τη βασική όσο και τη διεγερμένη παραγωγή IFN-𝛾 και την ισορροπία Th1 / Th2 [24–26], τι μπορεί να σχετίζεται με την αντι- φλεγμονώδεις ιδιότητες. Έτσι, αυτή η μείωση της IFN- που παρατηρήθηκε στις ομάδες που έλαβαν PHE θα μπορούσε να προκαλέσει βελτίωση στην πνευμονική φλεγμονώδη κατάσταση. Αυτή η υπόθεση υποστηρίζεται από μελέτες που έδειξαν ότι η πρόπολη και τα προϊόντα της προκαλούν αναστολή στη σύνθεση προσταγλανδινών, λευκοτριενίων και ισταμινών που απελευθερώνονται in vitro από κύτταρα πνεύμονα χοίρου [23] και κατά τη διάρκεια επαγόμενης οξείας περιτοναϊκής φλεγμονής in vivo [27]. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.


Εκτός από την ανασταλτική επίδραση της πρόπολης στην IFN-𝛾 και στην πρόσληψη φλεγμονωδών κυττάρων, μια άλλη εξήγηση για τη δράση της πρόπολης στο μοντέλο που χρησιμοποιείται εδώ είναι η αντιοξειδωτική της δράση. Η φλεγμονώδης διαδικασία του άσθματος μπορεί να σχετίζεται με μια μεγάλη απελευθέρωση ελεύθερων ριζών, επειδή πολλαπλά φλεγμονώδη κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων των ηωσινοφίλων, των ουδετερόφιλων και των μακροφάγων, είναι ικανά να παράγουν αντιδραστικά είδη οξυγόνου σε θέσεις φλεγμονής. Κατά συνέπεια, η θεραπεία του άσθματος με αντιοξειδωτικά ήταν μια επιτυχημένη θεραπευτική στρατηγική. Οι Lee et al. [28], για παράδειγμα, απέδειξε ότι το οξειδωτικό στρες είναι καθοριστικός καθοριστικός παράγοντας του άσθματος και ότι η θεραπεία με αντιοξειδωτικό μπορεί να είναι μια χρήσιμη θεραπευτική στρατηγική.

Πρόσφατες μελέτες έχουν δείξει ότι το εκχύλισμα αιθανόλης της πρόπολης είναι ικανό να παρεμβαίνει σε επίπεδα αντιδραστικών ειδών οξυγόνου [29]. Η πρόπολη μείωσε επίσης την επαγόμενη από ελεύθερες ρίζες υπεροξείδωση λιπιδίων καθώς επίσης και αύξησε τη δραστικότητα της υπεροξειδίου δισμουτάσης [30]. Πιστεύεται ότι τα συστατικά της πρόπολης των ελευθέρων ριζών και υπεροξειδωτικών εξουδετέρωσης είναι υπεύθυνα για τις κύριες αναγεννητικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις αυτής της ουσίας [31].

Τα δείγματα πρόπολης που χρησιμοποιήθηκαν στην παρούσα μελέτη έδειξαν κυρίως φαινολικό οξύ και ολική φαινόλη όπως αναφέρθηκε προηγουμένως [20]. Αυτές οι ουσίες, που έχουν βρεθεί σε άλλα δείγματα πρόπολης, έχουν ταυτοποιηθεί ως οι κύριες ενώσεις με αντιφλεγμονώδη δράση [32] και μπορούν επίσης να σχετίζονται με την ευεργετική χρήση της πρόπολης σε αλλεργίες και άσθμα [33]. Ως εκ τούτου, καθώς η σύνθεση της πρόπολης μπορεί να ποικίλλει ανάλογα με την περιοχή, πιστεύεται ότι οι αντιαλλεργικές και αντιφλεγμονώδεις δράσεις της πρόπολης μπορεί να εξαρτώνται από μια πολύπλοκη αλληλεπίδραση μεταξύ διαφορετικών φυσικών φαινολικών ενώσεων και όχι μιας μόνο ένωσης [34].


Είναι σημαντικό να τονιστεί ότι η αναστολή της πνευμονικής φλεγμονής ήταν παρόμοια με εκείνη που παρατηρήθηκε για τη θεραπεία με δεξαμεθαζόνη, έναν ισχυρό αναστολέα της φλεγμονής των αεραγωγών [6]. Ωστόσο, η ανοσοκατασταλτική δράση της δεξαμεθαζόνης δεν παρατηρήθηκε στα ζώα που έλαβαν πρόπολη, καθώς ο αριθμός των κυττάρων στους λεμφαδένες, τον μυελό των οστών, τον σπλήνα και την περιτοναϊκή κοιλότητα δεν επηρεάστηκε και στις δύο ομάδες που έλαβαν πρόπολη. Έτσι, η πρόπολη φαίνεται να είναι μια πιο ασφαλής θεραπεία σε σύγκριση με τη δεξαμεθαζόνη.

Τέλος, η παρούσα μελέτη δείχνει ότι η πρόπολη έχει ανασταλτικές επιδράσεις στη φλεγμονή των αεραγωγών σε ένα μοντέλο άσθματος ποντικού, το οποίο δικαιολογεί τη χρήση του ως εναλλακτική / συμπληρωματική και χαμηλού κόστους θεραπεία χωρίς ουσιαστικά παρενέργειες.


Ελπίζουμε, επομένως, ότι η παρούσα εργασία θα συμβάλει στην τόνωση και τον εμπλουτισμό των συζητήσεων και της έρευνας σχετικά με το Scaptotrigona. postica propolis και θα οδηγήσει επίσης στην επικύρωση και τη βιολογική εφαρμογή της και θα προωθήσει τη διατήρηση ενός φυσικού είδους που έχει δείξει αυξημένη επιστημονική και οικονομική αξία τα τελευταία χρόνια.

Σχήμα 4: Η επίδραση της θεραπείας S. aff postica PHE στην κυτταρική εισροή στην περιτοναϊκή κοιλότητα και στα λεμφοειδή όργανα ποντικών που ανοσοποιήθηκαν και προκλήθηκαν με ΟνΑ αντιστοιχούν στον μυελό των οστών (α), στον λεμφαδένα (b) και στα σπλήνα (c), αντίστοιχα . Τα κύτταρα της περιτοναϊκής κοιλότητας συλλέχθηκαν και μετρήθηκαν για να εκτιμηθεί η κυτταρική μετανάστευση (d). Τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν 24 ώρες μετά την τελευταία πρόκληση. ≤ 𝑃 ≤ 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα OVA. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Συμπέρασμα

H Στοματική θεραπεία με πρόπολη μειώνει την παθολογία

που σχετίζεται με το μυϊκό άσθμα, αναστέλλοντας τόσο την εισροή φλεγμονωδών κυττάρων στον κυψελιδικό χώρο όσο και τη συστηματική εξέλιξη της αλλεργικής φλεγμονής.

Σύγκρουση συμφερόντων. Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων σχετικά με τη δημοσίευση αυτού του άρθρου.

Συνεισφορά συγγραφέων. Ο Jose Hidelbland Cavalcante de Farias και ο Aramys Silva Reis πραγματοποίησαν το πειραματικό έργο και συνέβαλαν εξίσου στο άρθρο. Οι Marcio Antonio Rodrigues Araujo, Maria Jos ´ e´ Abigail Mendes Araujo, Jardel Cavalcante de Farias, Eder ´ Magalhaes Silva Fialho, Anne Karine Martins Assunc ˜ ¸ao, ˜ Graciomar da Conceic¸ao Costa και Lucilene Amorim ˜ Silva συνέβαλαν στην ερμηνεία και προετοιμασία του χαρτιού. Η Rosane Nassar Meireles Guerra, η Maria Nilce Sousa Ribeiro και η Flavia Raquel Fernandes do Nascimento designed σχεδίασαν τα πειράματα και συνέβαλαν στην ερμηνεία και την προετοιμασία της εργασίας.

Ευχαριστίες. Οι συγγραφείς ευχαριστούν τους βραζιλιάνικους χρηματοδοτικούς οργανισμούς FAPEMA, CNPq, CAPES και FINEP για την οικονομική υποστήριξη. Οι Επιδράσεις της πρόπολης στο άσθμα.

Πηγή: NCBI (National Center for Biotechnology Information) Effects of Stingless Bee Propolis on Experimental Asthma

Βιβλιογραφικές Αναφορές

[1] E. D. Bateman, S. S. Hurd, P. J. Barnes et al., “Global strategy
for asthma management and prevention: GINA executive summary,” European Respiratory Journal, vol. 31, no. 1, pp. 143–178,
2008.
[2] R. Stirbulov, L. A. G. Bernd, and D. Sole, “IV Brazilian Guide- ´
lines for the Treatment of Asthma (Diretrizes Brasileiras para o
Manejo da Asma),” Revista Brasileira de Alergia e Imunopatologia, vol. 29, no. 5, pp. 222–245, 2006.
[3] B. S. Bochner and W. W. Busse, “Allergy and asthma,” The
Journal of Allergy and Clinical Immunology, vol. 115, no. 5, pp.
953–959, 2005.
[4] N. H. Ten Hacken, Y. Oosterhoff, H. F. Kauffman et al., “Elevated
serum interferon-𝛾 in atopic asthma correlates with increased
airways responsiveness and circadian peak expiratory flow
variation,” European Respiratory Journal, vol. 11, no. 2, pp. 312–
316, 1998.
[5] L. Cohn, R. J. Homer, N. Niu, and K. Bottomly, “T helper 1
cells and interferon 𝛾 regulate allergic airway inflammation and
mucus production,” The Journal of Experimental Medicine, vol.
190, no. 9, pp. 1309–1318, 1999.


[6] L. M. Schwiebert, L. A. Beck, C. Stellato, C. A. Bickel, B. S.
Bochner, and R. P. Schleimer, “Glucocorticosteroid inhibition
of cytokine production: relevance to antiallergic actions,” The
Journal of Allergy and Clinical Immunology, vol. 97, no. 1-2, pp.
143–152, 1996.
[7] U. Baschant and J. Tuckermann, “The role of the glucocorticoid
receptor in inflammation and immunity,” The Journal of Steroid
Biochemistry and Molecular Biology, vol. 120, no. 2-3, pp. 69–75,
2010.
[8] A. Kleiman and J. P. Tuckermann, “Glucocorticoid receptor
action in beneficial and side effects of steroid therapy: lessons
from conditional knockout mice,” Molecular and Cellular
Endocrinology, vol. 275, no. 1-2, pp. 98–108, 2007.
[9] A. L. de Siqueira, M. Russo, A. A. Steil, S. Facincone, M. Mariano, and S. Jancar, “A new murine model of pulmonary
eosinophilic hypersensitivity: contribution to experimental
asthma,” The Journal of Allergy and Clinical Immunology, vol.
100, no. 3, pp. 383–388, 1997.


[10] D. E. Bice, J. Seagrave, and F. H. Green, “Animal models of
asthma: potential usefulness for studying health effects of
inhaled particles,” Inhalation Toxicology, vol. 12, no. 9, pp. 829–
862, 2000.
[11] J. W. Dobrowolski, S. B. Vohora, K. Sharma, S. A. Shah, S. A.
H. Naqvi, and P. C. Dandiya, “Anti-inflammatory, antibacterial,
antifungal, antiamebic, and antipyretic studies on propolis bee
products,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 35, no. 1, pp. 77–
82, 1991.
[12] B. Bueno-Silva, S. M. Alencar, H. Koo et al., “Anti-inflammatory
and antimicrobial evaluation of neovestitol and vestitol isolated
from Brazilian red propolis,” Journal of Agriculture and Food
Chemistry, vol. 61, no. 19, pp. 4546–4550, 2013.
[13] N. Paulino, S. R. Abreu, Y. Uto et al., “Anti-inflammatory effects
of a bioavailable compound, Artepillin C, in Brazilian propolis,”
European Journal of Pharmacology, vol. 587, no. 1–3, pp. 296–301,
2008.
[14] M. A. R. Araujo, S. A. Liberio, R. N. M. Guerra, M. N. S. Ribeiro, ´
and F. R. F. Nascimento, “Mechanisms of action underlying the
anti-inflammatory and immunomodulatory effects of propolis:
a brief review,” Revista Brasileira de Farmacognosia, vol. 22, no.
1, pp. 208–219, 2012.
[15] V. Dimov, N. Ivanovska, N. Manolova, V. Bankova, N. Nikolov,
and S. Popov, “Immunomodulatory action of propolis. Influence on anti-infectious protection and macrophage function,”
Apidologie, vol. 22, no. 2, pp. 155–162, 1991.
[16] M. J. A. M. Araujo, R. P. Dutra, G. C. Costa et al., “Effect of ´
treatment with Scaptotrigona aff. postica propolis on the development of Ehrlich tumors in mice (Efeito do tratamento com
propolis de ´ Scaptotrigona aff. postica sobre o desenvolvimento
do tumor de Ehrlich em camundongos),” Revista Brasileira de
Farmacognosia, vol. 20, no. 4, pp. 580–587, 2010.
[17] N. Orˇsolic and I. Ba ´ ˇsic, “Water-soluble derivative of propolis ´
and its polyphenolic compounds enhance tumoricidal activity
of macrophages,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 102, no. 1,
pp. 37–45, 2005.
[18] I. Urquiaga and F. Leighton, “Plant polyphenol antioxidants and
oxidative stress,” Biological Research, vol. 33, no. 2, pp. 55–64,
2000.
[19] F. D. Marquele, V. M. di Mambro, S. R. Georgetti, R. Casagrande,
Y. M. L. Valim, and M. J. V. Fonseca, “Assessment of the antioxidant activities of Brazilian extracts of propolis alone and in
topical pharmaceutical formulations,” Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, vol. 39, no. 3-4, pp. 455–462, 2005.
[20] M. J. A. M. Araujo, N. S. Mattar, A. S. Reis et al., “Pharmacog- ´
nostic and acute toxicological evaluation of Scaptotrigona aff.
postica propolis extract in pre-clinical assays,” Natural Product
Research, vol. 25, no. 11, pp. 1037–1046, 2011.

[21] M. Russo, M.-A. Nahori, J. Lefort et al., “Suppression of asthmalike responses in different mouse strains by oral tolerance,”
American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology, vol.
24, no. 5, pp. 518–526, 2001.
[22] L. B. Sy, Y.-L. Wu, B.-L. Chiang, Y.-H. Wang, and W.-M.
Wu, “Propolis extracts exhibit an immunoregulatory activity in
an OVA-sensitized airway inflammatory animal model,” International Immunopharmacology, vol. 6, no. 7, pp. 1053–1060,
2006.
[23] M. T. Khayyal, M. A. El-Ghazaly, and A. S. El-Khatib, “Mechanisms involved in the antiinflammatory effect of propolis
extract,” Drugs under Experimental and Clinical Research, vol.
19, no. 5, pp. 197–203, 1993.
[24] A. C. Pagliarone, C. L. Orsatti, M. C. Bufalo et al., “Propolis ´
effects on pro-inflammatory cytokine production and Toll-like
receptor 2 and 4 expression in stressed mice,” International
Immunopharmacology, vol. 9, no. 11, pp. 1352–1356, 2009.
[25] C. L. Orsatti, F. Missima, A. C. Pagliarone, and J. M. Sforcin,
“Th1/Th2 cytokines’ expression and production by propolistreated mice,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 129, no. 3, pp.
314–318, 2010.

[26] F. Missima, A. C. Pagliarone, C. L. Orsatti, J. P. Araujo Jr., and J. ´
M. Sforcin, “The effect of propolis on Th1/Th2 cytokine expression and production by melanoma-bearing mice submitted to
stress,” Phytotherapy Research, vol. 24, no. 10, pp. 1501–1507,
2010.
[27] O. K. Mirzoeva and P. C. Calder, “The effect of propolis and its
components on eicosanoid production during the inflammatory response,” Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty
Acids, vol. 55, no. 6, pp. 441–449, 1996.
[28] Y. C. Lee, K. S. Lee, S. J. Park et al., “Blockade of airway hyperresponsiveness and inflammation in a marine model of asthma
by a prodrug of cysteine, L-2-oxothiazolidine-4-carboxylic
acid,” The FASEB Journal, vol. 18, no. 15, pp. 1917–1919, 2004.
[29] H. Xuan, R. Zhu, Y. Li, and F. Hu, “Inhibitory effect of Chinese propolis on phosphatidylcholine-specific phospholipase C
activity in vascular endothelial cells,” Evidence-based Complementary and Alternative Medicine, vol. 2011, Article ID 985278,
8 pages, 2011.


[30] I. Jasprica, A. Mornar, Z. Debeljak et al., “In vivo study of
propolis supplementation effects on antioxidative status and red
blood cells,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 110, no. 3, pp.
548–554, 2007.
[31] W. Krol, S. Scheller, Z. Czuba et al., “Inhibition of neutrophils’
chemiluminescence by ethanol extract of propolis (EEP) and its
phenolic components,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 55,
no. 1, pp. 19–25, 1996.
[32] V. B. Bankova, “Recent trends and important developments in
propolis research,” Evidence-based Complementary and Alternative Medicine, vol. 2, no. 1, pp. 29–32, 2005.
[33] M. Medic-Saric, V. Rastija, M. Bojic, and Z. Males, “From functional food to medicinal product: systematic approach in
analysis of polyphenolics from propolis and wine,” Nutrition
Journal, vol. 8, no. 1, article 33, 2009.
[34] S. Chirumbolo, “Propolis as anti-inflammatory and anti-allergic compounds: which role for flavonoids?” International
Immunopharmacology, vol. 11, no. 9, pp. 1386–1387, 2011.

Τα σχόλια σας μας κάνουν καλύτερους!